PGR (polimerazės grandininės reakcijos) testavimas yra pagrindinė molekulinės diagnostikos technologija. Jo pakuotės ir bandymo procesų standartizavimas daro tiesioginį poveikį rezultatų tikslumui ir biologiniam saugumui. Šis straipsnis pateikia profesionalų perspektyvą apie pagrindinius kokybės kontrolės taškus visame PGR bandymo procese.
Imties kvitas ir išankstinis apdorojimas yra pirmieji proceso žingsniai. Laboratorijos turi griežtai patikrinti imties identifikavimo, transportavimo sąlygas ir laikymo laiką, kad būtų užtikrintas mėginio vientisumas. Gavus mėginius, mėginiai turi būti sunumeruoti ir įregistruoti biologinės saugos spintelėje ir atlikti iš anksto - apdorojimo procedūras, tokias kaip lizė ir nukleorūgšties ekstrahavimas pagal bandymo tipą. Šiame etape reikia dviejų - asmens patikrinimo sistemos, kad būtų išvengta kryžminio - užteršimo.
PGR reakcijų sistemos paruošimas turi būti atliekamas švariame suoliuke. Operatoriai privalo dėvėti 3 lygio apsauginę įrangą ir naudoti „Nuclease -“ nemokamas eksploatacines medžiagas. Reagento paruošimas laikosi principo „vienareikšmio darbo eigos“, pereinant nuo reagentų paruošimo vietos į mėginių apdorojimo sritį ir tada į amplifikacijos plotą. Neigiama kontrolė, teigiama kontrolė ir vidinė kontrolė turi būti įtraukti į kiekvieną reakcijos partiją, kad būtų galima stebėti eksperimentinį pagrįstumą.
Amplifikacijos ir bandymo fazės metu PGR prietaisas turi būti iš anksto patikrintas - kalibruotas ir patikrintas temperatūros ciklo parametrai. Reakcijos procedūroje paprastai yra trys etapai: denatūracija (94 - 95 laipsnis), atkaitinimas (50–65 laipsnis) ir pratęsimas (72 laipsnis). Ciklų skaičius koreguojamas atsižvelgiant į aptikimo tikslą. Realaus laiko fluorescenciniame PGR taip pat reikalauja stebėti specifinių kanalų fluorescencijos signalo slenkstį.
Rezultatų analizę ir ataskaitas turi atlikti kvalifikuoti technikai. Neapdorotus duomenis turi peržiūrėti mažiausiai du specialistai, kad patvirtintų amplifikacijos kreivės morfologiją, KT vertės patikimumą ir kokybės kontrolės medžiagos laikymąsi pagal standartus. Galutinėje ataskaitoje turėtų būti informacija apie bandymo metodiką, rezultatų aiškinimo pagrindą ir bandymo apribojimų pareiškimą.
Visas procesas griežtai laikosi ISO 15189 ir atitinkamų CDC specifikacijų. Siekiant užtikrinti PGR bandymo patikimumą ir atsekamumą, įgyvendinama triguba garantija aplinkos stebėjimo, įrangos priežiūros ir personalo mokymo sistema.